样本采集

  一、概述
  临床检验结果直接关系到患者诊断和治疗的准确性。标本的采集和运送直接关系到检验结果的正误,因此在标本采集、送检、保存等各个环节都要规范操作、严格控制,这是确保检验结果准确可靠的前提。


  二、患者准备
  合格的标本是检验结果准确性的前提。医护人员、标本采集人员、检验技术人员应了解标本采集前患者的状态要求和影响结果的非疾病性因素,并将相关的要求和注意事项告知患者,以求患者给与配合,使所采集的标本尽可能减少非疾病因素的影响,保证所采集的标本能客观真实地反映当前疾病的状态。患者的准备是保证送检样本质量的内在条件及前提要求,而保证送检样本的质量是这一阶段质量保证工作的核心。
  1.病人状态
  一般需在安静状态下采集样本,如患者处于高度紧张的状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高,运动能影响许多项目的测定结果,运动的影响可分暂时性和持续性两类。暂时性影响,如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高30%-50%。
  2.饮食
  多数试验要求在采血前禁食8-12h,因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。
  1)餐后血液中TG、GLU、、Na+等均可升高,进食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中BNU和UA的增高。进食高脂肪食物后采集的的血液样本,其血清会出现浑浊,可影响许多检验测定的正确性。甚至喝带咖啡的饮料,可以引起AMY、AST、ALT、ALP等升高。但空腹时间过长,会使GLU、TP降低,而BIL升高。
  2)高脂餐后2-4h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。
  3)高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。
  4)高比例不饱和脂肪酸食物,可降低CHOL含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。
  5)含咖啡因饮料,咖啡因可抑制磷酸二酯酶活性,使cAMP水平升高,促进糖酵解,使血浆葡糖糖水平轻度下降。也可使血浆游离脂防酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。
  6)食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。
  7)饮酒后可使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等増加,长期饮酒者HDL-CH偏高、平均血细胞体积增加、GGT亦较不饮酒的病人高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。
  8)吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下;香烟中尼古丁会刺激肾上腺髓质和肾上腺皮质,使血液中肾上腺素升高,从屎尿中排除的儿茶酚胺及其代谢产物VMA也升高;血液中GH浓度对香烟特别敏感,抽烟后30分钟内GH可以升高10多倍;生化指标如:β脂蛋白、CHOL、TG等高于不抽烟者,HDL-CH低于不吸烟者,吸烟者白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。
  9)蘑菇等菌类,会引起真菌G试验假阳性。
  3.药物
  药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。
  (1)药理作用对检验结果的影响
  1)、庆大霉素、氨苄青霉素可使ALT活性增高,高浓度的青霉素可导致尿蛋白检测的假阴性。
  2)、甲状腺素药:使GLU升高,CHOL降低
  3)、咖啡因:使GLU、BIL、CHOL增高。
  4)、维生素C:使?TCHOL、TG、HDL-CH、UA降低。
  5)、口服避孕药:使TBG、PLG、TRF、血清Fe和TG升高、ALB和血清Zn降低。
  6)、某些药物能够造成肝、肾功能的损害,引起相关指标的变化。
  (2)对检验项目的测定方法产生影响
  1)、对于用比色法检测的项目,某些药物的物理特性比如颜色会影响比色。
  2)、药物参与检测时的化学反应,如有还原性的药物对于利用氧化还原法测定项目会有影响;某些药物可以抑制酶的活性,对于测定酶活性的项目会使结果降低。
  4.体位
  体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,细胞成份和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为立位,
  血浆ALB、TP、酶、BIL、TCHOL及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集样本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。
  5.时间
  病人准备还应考虑病人的生物规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;CHOL则在经前期最高,排卵时最低;Fg在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。GH于入睡后会出现短时高峰。BIL、血清Fe以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血应在相同时间进行。
  6.溶血
  溶血可能是由某些疾病引起,但主要是在采血过程中或样本处置不当引起。其对于样本检测会产生以下干扰:
  (1)光学干扰,比色时会产生分析误差。
  (2)红细胞内的某些物质与血清或血浆中的含量相差悬殊,如:K、Mg2、P、ALT、AST、血清Fe2、LDH等。因此,中度或重度溶血时,必须重新采集样本。此外,样本溶血的主要原因如下:
  1)止血带施压时间过久(不超过3分钟)。
  2)穿刺部位的皮肤有酒精残留。
  3)针头、针简或血液容器内有污染或水气。
  4)使用的针头孔径太小。
  5)针筒内的血液由针头排到容器中。
  6)抽血时有空气进入针简。
  7)抽血时太快或用力太大。
  8)血液与抗凝剂混合时剧烈振荡。
  9)血液没有完全凝固就离心。
  7.脂血
  脂血样本对检测会产生以下干扰:
  (1)脂血造成的浑浊会在比色测定时引起光线散射,导致吸光值误差。
  (2)脂血会造成电解质检测结果误差。
  (3)脂血会导致PCR前期磁珠法提取核酸失败。
  脂血产生的原因如下:
  1)抽血前食入富含脂肪的食物。
  2)空腹患者有脂血现象,属于病理因素:TG过高血浆或血清呈浑浊状;CHOL含量高,血清或血浆外观没有变化;有乳糜微粒会在血清液面浮上一层奶油状物质。


  三、样本采集及注意事项
  1.血液样本
  血液样本主要分为:全血样本、血清样本和未梢血样本。
  (1)全血样本
  1)全血样本的采集:采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。采用真空采血管静脉采血(2-5ml),血样加入含有抗凝剂的试管中,立即轻轻颠倒混匀8次。
  2)全血样本的保存:抗凝全血应常温(18-25℃)保存。低温将影响部分测试项目的测定结果(如血小板减少,中性粒细跑和单核细胞的形态改变等),切忌冷冻全血样本(易造成样本溶血)。
  3)请按项目类型分管采样:因全血样本在检测过程中各科室间流转会影响报告时间和结果的准确性;分注样本又极易造成血细胞和血浆比例的不当。
  (2)血清样本
  1)血清样本的采集:采用真空采血管静脉采血(3-5ml),血样加入空白或带  有分离胶的试管中。室温或置于37℃水浴箱中,1小时左右分离血样(4000rpm,5分钟),最迟不超过2小时,否则影响测试结果。例如血糖(GLU),由于糖酵解,血糖浓度会持续下降;血清钾(K+)则随着时间的延长而增高;神经元特异性烯醇化酶(NSE)、降钙素(CT)等其它项目也会有不同程度的影响。
  2)血清样本点的保存:对于分离好的血清样本。为了防止样本中水分的挥发
  应移入带塞的试管中。如不能及时送检,应置冰箱冷藏(2—8℃)保存,为保证血清待测成分的稳定,基本能够保存3天以上(GLU除外),冷冻保存(-20℃)可保存更长时间。
  (3)末梢血样本
  1)末梢血样本的采集:用一次性采血针针刺采集,成人以左手无名指为宜,1岁以下婴幼儿通常用要幼儿通常用大拇指或足跟部两侧,采集适量的血液入专用末梢采集管内,及时混匀,避免凝集,让血液自然流出并弃去第一滴血。不要挤压,避免混入组织液而造成样本的稀释,故针刺要顺利。常用于血细胞计数、微量元素(静脉血采集困难者)检测等。
  2)末梢血样本的保存:常温保存(18-25℃)。
  (4)血液样本采集注意事项
  1)对于全血样本应正确使用测定相应的抗凝剂,并且应注意血液与抗凝剂的比例(真空采血管多标有具体的采血量)。目前常用的抗凝剂有枸橼酸盐、EDTA盐和肝素等。
  2)血清样本应避免溶血,对于严重溶血的样本应拒收。
  3)要特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高,如输K、GLU时,可使所测K、GLU明显升高),或使血液稀释结果偏低。
  4)采集血样做血液细菌培养、染色体检查、PCR检查时,要采用无菌技术,防止污染。
  2.尿液样本
  (1)尿液样本的采集
  根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。
  1)晨尿多为住院病人留尿的方法,早晨起床后收集第一次尿,可用于尿常规检验、直立性尿蛋白检查、尿HCG检查、细胞学研究。
  2)随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。适用于门诊、急诊检查。
  3)餐后尿为收集进餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代谢情况,用以筛査隐性糖尿病或轻症糖尿病。
  4)计时尿应于计时开始时排空尿液,收集一段时间内的尿液样本。多用于肾功能和有形成分排出率的评估,亦用于计算淀粉或肌酐的排出率。
  尿液样本
  (2)尿液样本的保存
  尿液易生长细菌,如不能及时送检或需留大量样本(如24小时尿),应置冰箱冷藏或加防腐剂。防腐剂应在收集第一次尿液时加入,并根据检测项目选择适当的防腐剂。
  1)甲苯:适用于尿液生化检测,如总蛋白、尿素、肌酐、尿酸、钾、钠、蛋白等,        加入量为0.5-1.0ml甲苯/100ml尿液。
  2)盐酸:适用于测定尿17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇、肾上腺素、去甲肾上腺素、香草扁桃酸、儿茶酚胺等试验,加入量为0.5-1ml浓盐酸/100ml尿液。
  3)麝香草酚:常用于尿液浓缩结核菌检查和尿沉渣Addis计数,不适合尿蛋白测定。
  4)冰醋酸:适用于测定24小时尿醛固酮,加入量为0.5-1ml冰醋酸/100ml尿液。
  5)甲醛:适用于尿液管型和细胞检查,加入量为400g/L甲醛0.5mL/100ml尿液。
  (3)尿液样本收集的注意事项
  1)容器上应贴上标记,不可贴在盖子上。标记内容必须包括:病人的全名,可识别病人的样本特异性编码和样本收集的时间。
  2)尿液样本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。此外,还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入。
  3)尿胆红素和尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。样本送检时应注意避光。
  4)24小时尿液样本,送检前记录尿液总量,混匀后取5ml送检。
  3.粪便样本
  (1)粪便样本的采集
  粪便样本应选择其中脓血黏液等病理成分送检,若无病理成分,可多部位取材。粪便样本应不污染容器外表,一般以无渗漏容器留取5-10g(蚕豆大小)即可。检查蛲虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭子擦拭肛门周围,可得虫卵。
  (2)注意事项
  1)采取样本后,应在1h内完成检测,否则可因pH及消化酶等影响而使粪便细胞成分破坏分解。
  2)隐血试验,应嘱患者于采集样本前3天起禁食动物性食物。连续检查3天,并选取外表及内层粪便。采集样本后须迅速进行检查,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。
  3)粪胆原定量检查应收集3天的粪便,混合称量,从其中取出约20g送检。查胆汁成分的粪便样本不应在室温中长时间放置,以免阳性率减低。
  4)做原虫阿米巴滋养体检查应立即送检,冬季需采取保温措施。
  4.脑脊液、浆膜腔积液、关节液(滑膜液)
  均由临床医师穿刺采样,实验室应提供专用的各种试管或容器,及时送检。
  (1)样本的收集
  1)脑脊液:分别收集于三个无菌试管(或小瓶)中,每管1-2ml。第一管做细菌培养,必须留于无菌小管中;第二管做化学或免疫学检查;第三管做一般性状检查和显微镜检查。脑脊液组胞计数管应避兔样本凝固,遇高蛋白样本时,可用EDTA盐抗凝。
  2)浆膜腔积液:均由临床医生穿刺采样,及时送检(8小时内)。
  A.样本收集:应收集于专用的EDTA盐干粉抗凝管内,取1管不抗凝+1管EDTA抗凝;
  B.填写专用申请单;
  C.收到样本后立即送检,久置可破坏细胞。
  3)滑膜液:应用消毒注射器收集,正常时滑膜液量甚少,病理时则可多达3-10ml,因检查项目不同、容器不同,故应事先准备有关容器,微生物培养应置于灭菌消毒试管,显微镜镜检应用肝素抗凝样本,每毫升约用肝素钠25单位(不可用肝素锂、草酸盐或EDTA干粉,以免人为形成晶体,干扰显微镜检查)。
  (2)注意事项
  2.收到样本后立即送检,久置可致细胞破坏,影响细胞计数及分类检查;葡萄糖含量降低,病原菌破坏或溶解。
  5.痰液
  (1)痰液的收集
  1)痰液的一般检查应收集新鲜痰,病人起床后漱口(用3%双氧水及清水漱3次),用力咳出气管深处呼吸道分泌物,勿混入唾液及鼻咽分泌物。
  2)细胞学检查用上午9:00-10:00点深咳的痰液及时送检(清晨第一口痰在呼吸道停留时间久,细胞变性结构不清),应尽量送含血的病理性痰液。
  3)浓缩法找抗酸杆菌应留24小时痰(量不少于5ml),细菌检验应避免口腔、鼻咽分泌物污染。
  4)幼儿痰液收集困难时,可用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射,用棉拭子采取样本。
  6.尿道分泌物、阴道分泌物、宫颈分泌物
  (1)样本的采集
  1)男性尿道分泌物取材:用棉球沾无菌生理盐水洗净尿道口,细小棉拭子取尿道分泌物或伸入尿道约2-4cm,转动数圈停留约30秒取分泌物(应略带黏膜),收集于无菌试管内送检。
  2)女性宫颈分泌物取材:分泌物样本采样应在非月经期进行;采样前3天内不使用阴道内药物,不冲洗阴道;24小时内不应有性行为。用棉签沾无菌生理盐水洗去宫颈外分泌物(去除白带),再用宫颈刷插入宫颈内,停5秒钟后旋动宫颈刷采取宫颈分泌物,收集于细胞保存管内送检。
  3)阴道分泌物取材:棉拭子取材。
  4)尖锐湿疣应釆集疣体和宫颈分泌物于细胞保存管内送检。
  (2)注意事项
  1)由临床医师采样,及时送检。检查滴虫,冬季应注意样本保温。
  2)PCR试验要求将带有样本的棉拭子置1.5ml离心管(加1ml无菌生理盐水)中漂洗,将盖子压紧用胶布密封管口以防样本外泄。处理样本时要做到无菌操作。
  7.其他样本(如精液、前列腺液、胃液、十二指肠引流液)
  根据具体检验项目而定。临床医师在开申请单前,应同实验室相关部门联系,注明检测要求,再采样并及时送检。
  8.微生物样本的采集
  (1)基本原则
  1)发现感染应及时采集微生物样本作为病原学检查,二、三级医院微生物样
  送检率不应低于70%。
  2)尽量在抗菌药物使用前采集样本;如已用药,则应选择血液药物浓度最低
  平时采样。
  3)样本采集时应严格执行无菌操作,减少或避免机体正常菌群及其他杂菌
  污染。
  4)样本釆集后应立即送至实验室。床边接种可提高病原菌检出率。
  5)棉拭子如咽拭、肛拭、伤口拭子采集的样本,宜插入运送培养基送检。
  6)混入正常菌群的样本,如:痰、粪便,不可置肉汤培养基内送检。
  7)盛样本容器须经灭菌处理,但不得使用消毒剂。
  8)送检样本应注明来源、样本类型和检验目的,使实验室能正确选择相应的培养基和适宜的培养环境。
  (2)样本采集要求
  细菌培养的样本收集时应注意无菌操作,所用的培养皿、试管必须无菌。
  1)下呼吸道分泌物(痰液):嘱患者清晨起床后用清水漱口,立即从下呼吸道咳出第一口痰,吐在专用的无菌杯内,常温保存送检。痰样品直接显微镜检查找抗酸杆菌或结核分枝杆菌培养,应送检三份痰样品;最好至少连续3日,采集每日清晨第一口痰。如不能及时送检者,可暂存4℃冰箱。
  2)粪便:取有粘液、脓血部分的粪便约2-3g(蚕豆大小,稀水便则取絮状物),盛于灭菌广口瓶或无菌容器中。用棉拭子挑取粪便插入运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油中送检,可提高病原菌检出率。
  3)血液、脑脊液、胆汁、穿刺液、胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液:无菌抽取5ml注入专用培养瓶(增菌液)中,轻轻混匀,常温保存送检。
  4)尿液培养:取中段尿5-10ml于无菌试管中送检。
  5)生殖器官样本:阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医生采集,收集于无菌试管内送检。尖锐湿疣应采集疣体或组织液于无菌试管内送检。
  6)烧伤样本:专用无菌棉拭子直接采取多个部位创面的脓液分泌物,放入于无菌试管内送检。
  (3)样本的运送
  1)抗凝全血、末梢血样本应常温(18-25℃)保存和运送。切忌和冰袋直接接触。
  2)分离好的血清样本应在(2-8℃)条件下运送(保温箱中放入冰袋)。
  3)尿液、粪便、痰液、尿道分泌物、阴道分泌物、宫颈分泌物、脑脊液、胆汁、穿刺液、胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液常温条件下(18-25℃)运送。不能及时送检的尿液、痰液样本可冷藏(2-8℃)保存与运送。
  (4)微生物样本的运送
  1)已采集样本,常规性细菌学检验,常温不超过1h送交实验室,延迟运送影响
  病原菌检出。
  2)常规性细菌培养样本保存在4℃也不能超过24小时。
  3)包括厌氧菌培养的临床细菌检验样本,运送时间与原始样本的量有关,样本
  量少应加快运送,可在15-30min内送达。不能及时运送样本时必须保存在厌氧环境中(温度25℃),可保存20-24小时。。
  4)如疑似对低温敏感的淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌感染样本应立即处理。脑脊液、生殖道、眼睛、内耳样本绝不可冷藏。
  5)样本在冬季运送应保温(如脑脊液样本常规检查,阴道分泌物滴虫的检查,粪便中阿米巴滋养体的检查);夏季防止样本的干燥。


  四、样本的验收
  1.验收的基本程序和内容
  1)唯一性标识是否正确无误;
  2)申请检验项目与样本是否相符;
  3)样本容器是否正确、有无破损;
  4)检查样本的外观及样本量外观有无溶血、血清有无乳糜状、抗凝血中有无凝块等;细菌培养的样本有无被污染的可能;
  5)检查样本采集时间与接收时间的间隔。
  2.拒收标准
  1)唯一性标识错误、脱落、丢失;
  2)样本容器类型不符、破损;
  3)严重溶血、脂血;
  4)抗凝血中有凝块;抗凝血未加抗凝剂或与抗凝剂比例不正确者;
  5)样本量不足;
  6)未按项目采集要求添加防腐剂;
  7)泄露、污染的样本;
  8)输血、输液中采集的样本;
  9)采集样本至送检时间间隔过长。


  五.特殊检测项目样本采集要求
  1.高血压四项、醛固酮标本采集注意事项
  1)采血管类型:须用EDTA-K2采血管(紫色盖),其他样本类型不能用于检测。
  2)采血量:实验要求血浆量至少500uL,因此,采血量要求在2-2.5mL。
  3)注明体位:由于体位对高血压三项、醛固酮的指标有较大影响,因此,标本申
  请单和报告单中必须注明体位(立位或者卧位);
  基础状态(卧位):受试者进普通饮食,采血前卧床过夜或卧位1.5-2小时后再采血;
  激发状态(立位):保持立位,活动2小时后采血。
  4)标本处理:采血后,标本应尽快离心(3000转/3分钟)分离血浆(室温放置时间不宜超过1小时,如有血常规等项目尽量采2管血,避免室温放置时间过长,因长时间室温放置,将导致肾素活性、血管紧张素l、血管紧张素‖测值不同程度变化。)分离好的血浆标本,请冷藏运输,若无法当天送检,请医院协助冷冻保存。
  5)患者准备:患者应普钠饮食三天后再进行检测。钠摄入量高会降低PRA和血、尿醛固酮的水平,而摄入量低则能使其提高;测定前患者应停用降压药3周以上;停用利尿剂4周以上;停用避孕药6周以上;不宜停药的患者考虑改用对实验影响较小的药物,如胍乙啶。
  6)生物钟节律:新生儿浓度最高,随着年龄增加而不断降低;月经周期卵泡期降低,黄体期及妊娠时升高;同一状态下,清晨2-8时肾素分泌最高,下午12-18时分泌量达低限;妊娠过程中,血浆肾素浓度升高,分娩后降至正常;抗高血压药:利尿剂、ACEI、钙拮抗剂、ɑ受体阻滞剂可使肾素活性升高;β受体阻滞剂、可乐宁使肾素活性降低。
  2.血儿茶酚胺(甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素)
  采集血样前4个小时内不要食用任何含咖啡因的食物(苏打、巧克力)、咖啡、烟草(吸烟或雪茄)、茶或含酒精的饮料。需要患者仰卧位放松30min后,进行采血;有条件的,建议采用留置针采血。采集的EDTA抗凝血,请于2-8℃条件下保存并于8小时内离心分离血浆,将分离的血浆(至少1mL)转移至干净的保存管中,2-8℃保存送检。
  3尿儿茶酚胺(甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素)
  收集尿样期间不要食用任何含咖啡因的食物(苏打、巧克力)、咖啡、烟草(吸烟或雪茄)、茶或含酒精的饮料。尿液收集前请在尿液收集容器中加入25ml(儿童≤5岁:15mL)50%的乙酸(分析纯)(优选)或10g(儿童:3g)硼酸(分析纯)。
  留取24小时尿量,同时在收集完成后记录24小时尿总量,收集过程中尿液标本需在2-8℃条件下保存,将收集的24小时尿混匀后至少取5ml至干净的尿液采集管中,2-8℃保存送检。样本请在2天内送检,超过2天请冷冻保存。
  4.糖耐量实试验(胰岛素、C肽释放试验)
  1)病人准备:试验前三天,每日进食碳水化合物不低于250-300g,且维持正常活动,影响试验的药物要停用,试验前10-16小时不能进食。
  2)样本的采集:清晨空腹坐位采血,5分钟后喝下250ml含75g无水葡萄糖的水溶液后分别于0.5、1.0、2.0、3.0小时采血,整个过程不可吸烟、喝咖啡、喝茶和进食。
  5.血促肾上腺皮质激素、血清皮质醇
  1)采血管类型:ACTH采用EDTA抗凝管,COR采用普通红头管或促凝管。
  2)采血时间:样本采集后,需注明采集时间(ACTH:上午9点、下午4点、凌
  晨0点,COR:上午8点、下午4点、凌晨0点)。
  2)标本处理:ACTH静脉穿刺采血,收集于冰冻的EDTA试管中。采集后应将试管置于冰浴中。低温离心分离血浆,而后立即用塑料或硅烷化玻璃试管分装冷冻保存(不要使用未硅烷化得玻璃管)。
  6.胃泌素
  1)采血管类型:普通红头管或促凝管;
  2)标本处理:抽血后立即分离血清并在5小时内进行测定,否则必须放于-20℃冷冻保存,三周内稳定。
  7.降钙素
  1)采血管类型:普通红头管或促凝管,肝素抗凝管
  2)样本保存:-20℃冷冻保存15天或-70℃保存更久。立即冷冻。
  8.尿香草苦杏仁酸测定
  需先在容器内加入5-10ml浓盐酸,再分别收集24小时尿,并记录24小时总尿量,将尿混匀后送检,需尿量15mL。(患者应禁止进食巧克力,咖啡,香蕉,柠檬以及阿司匹林和一些降压药,由于含有酚氧酸类可使结果假性升高)。
  9.尿17-羟皮质类固醇测定、尿17-酮类固醇检测
  需先在容器内加入5-10ml浓盐酸,再分别收集24小时尿,并记录24小时总尿量,将尿混匀后送检,单项需尿量15mL。(留尿前两天患者应停服中药,维生素B12等会使尿液颜色加深的药物)
  10.血流变
  肝素抗凝全血5mL,4℃,3小时内送检,另加一管1:4枸橼酸钠抗凝血2ml。
  11.外周血染色体样本送检要求及注意事项
  1)样本的采集和运输:外周血采集样本时要求无菌操作,不要污染管盖。请勿使用EDTA等抗凝管采集样本(建议使用肝素钠抗凝管)。样本采集后立即轻轻颠倒充分混匀,注意避免使用注射器采集后直接注入采集管的方式进行样本采集,以免引起溶血,不可冷冻保存、不可置高温环境中。保证样本运送的温度:2-8℃,并在24小时内运送至本中心。运输过程中切勿和冰袋直接接触。一般外周血用5mL抗凝管采血量3-4mL。
  2)凝血、溶血、污染的样本均视为不合格样本,避免送检。采血后超过24小时,血量少于2mL的样本尽量不要送检。
  3)申请单的填写:填写完整染色体申请单,尤其是姓名、年龄、性别、样本采集日期及时间、临床体征、临床诊断,还包括病人的病史、生育史、家族史、样本的类型、联系电话、染色体带纹要求、医生联系电话等尽量不要遗漏。
  12.HPV临床样本的采集注意事项
  (1)检查前告知病人注意事项
  1)月经正常妇女,在月经来潮后10-18天为最佳检查时间;
  2)检查前48小时内不作阴道冲洗,不使用避孕药膏等阴道内用药物;
  3)检查前48小时避免性生活;
  4)检查前不进行醋酸或碘液涂抹。
  (2)样本采集
  1)由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈,在取样前先用棉签擦去宫颈分泌物;
  2)使用专用的HPV采样刷置于宫颈口,轻轻转动宫颈刷使其顺时针旋转5-10圈;
  3)慢慢取出宫颈刷,将其放入标有病人编号的取样管中,取样管内已加有专用细胞保存液,折断其刷头入管中,拧紧瓶盖。
  (3)样本采集注意事项
  1)取样管中有专用保存液,可抑制细菌生长,保持DNA完整性,请勿倒掉管中保存液;
  2)宫颈细胞保存系统包装打开后,必须立即进行采样;
  3)为保留足够的宫颈细胞样本,注意切勿将宫颈刷头丢弃;
  4)宫颈刷头折断过程中,请小心操作,切忌大力震荡取样管,造成保存液及样本溅出影响检测结果或造成污染;
  5)取样管上标示的名称须与患者一一对应;
  6)取样后,切记拧紧取样管管盖;;
  7)如果同时进行细胞学检查,应先采集细胞学样本。
  (4)样本保存
  1)样本一经采集,则应尽可能快的送至本中心;
  2)如若不能马上送检样本,请于4℃保存,在2个星期内进行检测。
  13.基因检测类,鳞状细胞癌相关抗原测定(SC)样本
  请用单独采样管采样送检,因为这些项目在实验室移液过程中极易被污染,
  影响检测结果准确性。
  13.骨髓形态学、流式等血液肿瘤类检测
  (1)骨髓涂片常规检查
  1)样本采集
  选取含骨髓小粒、头体尾分明、厚薄适宜、边缘整齐的骨髓涂片6-8张送检。
  2)样本保存
  常温保存,建议采用药品纸盒小心包裹送检,不可采用塑料玻片盒,以防止不透气和反潮。
  3)注意事项
  必须附送检单,并保证信息完整性,包括病人姓名、性别、送检医生以及联系方式、外周血常规各类结果、临床体征,临床诊断等。如病人有骨髓纤维化或其他等原因引起的干抽,请在送检单上注明。尽量在治疗前抽取骨髓,若有药物治疗,请注明药物类型。
  (2)免疫表型类检查
  1)样本采集
  肝素或EDTA抗凝骨髓2-3mL
  2)样本保存
  一般建议常温保存,夏季或其他高温环境建议冷藏送检,避免细胞凋亡过快;
  3)注意事项
  必须附送检单,并保证信息完整性,包括病人姓名、性别、送检医生以及联系方式、外周血常规各类结果、临床体征、临床诊断等。如病人有骨髓纤维化或其他等原因引起的干抽,请在送检单上注明,尽量在治疗前抽取骨髓,若有药物治疗,请注明药物类型。
  15.PCR检测项目样本采集注意事项
  (1)全血样本使用EDTA或枸橼酸钠盐抗凝,禁止使用肝素作为抗凝剂
  (2)用于DNA(?HBV-DNA)扩增检测的血液标本采集应使用无DNase的一次性密闭容器,如需分离血清或血浆,应将或血浆装入无DNase的洁净离心管送检。
  (3)用于RNA(?HCV-RNA)扩增检测的血标本宜进行抗凝处理,并在3小时内分离血浆,以避免RNA降解。分离后应将血浆装入经高压或无DNase的洁净离心管内。如末做抗凝处理,则在抽血后1小时內分离血清。
  (4)生殖道拭子样本采集
  采集生殖道拭子样本,要求病人在采样前2小时内不能排尿
  1)尿道:先清洁尿道口,将棉试子伸入尿道内约2-3cm,稍用力旋转,保留数秒再取出。以采集到黏膜上皮细胞,放入1ml无菌生理盐水中漂洗片刻,于试管壁上挤干丟弃。
  2)宫颈∶取材前用温水或生理盐水润湿扩阴器,应避免使用防腐剂和润滑剂。先用棉试子将宫颈口过多的分泌物擦去,用扩阴器扩阴,再将取样棉试子伸入宫颈管内1-2cm,稍用力旋转,保留10-30秒后取出,放入1ml无菌生理盐水中漂洗片刻,于试管壁上济干丢弃。
  3)阴道:将取材拭子至于阴道后穹窿10-15秒,采集阴道分泌物。如果处女膜完整,则从阴道口取材,放入1ml无菌生理盐水中漂洗片刻,于试管壁上挤干丢弃。


  六、真空管的使用

头盖颜色

样本类型

添加剂

适用范围

要求

紫色

全血

EDTA-K2

适用于血液常规检查、糖化血红蛋白检查

抽血后立即颠倒混匀8次

红色

血清

各种生化和免疫学检测

抽血后不要剧烈摇动

蓝色

全血

3.2%枸橼酸钠

适用于血凝实验和各种凝血因子等

抗凝剂与血液比例为1:9,抽血后立即颠倒混匀8次

黑色

全血

3.8%枸橼酸钠

适用于血沉检查

抗凝剂与血液比例为1:4,抽血后立即颠倒混匀8次

绿色

血浆

肝素钠

可用于急诊生化和某些特定的化验项目(如:微量元素、血流变等)

抽血后立即颠倒混匀8次

黄色

血清

促凝剂和分离胶

快速分离血清、适用于生化和血清学实验

橘红色

血清

纤维蛋白酶促凝剂

快速分离血清、适用于生化和血清学实验

抽血后立即颠倒混匀8次